采 用酶解法水解動(dòng)物血液制備生物活性肽成為最常用的方 法，具有價(jià)格低廉、易轉(zhuǎn)化等優(yōu)點(diǎn)。羊血營養(yǎng)價(jià)值豐富，但 目前對(duì)水解羊血清蛋白的研究相對(duì)較少，特別是利用堿性 蛋白酶法水解羊血清蛋白制備生物活性肽的研究鮮見報(bào) 道。本研究采用堿性蛋白酶水解羊血清蛋白，通過測(cè)定酶 解溫度、水解時(shí)間、水解pH值和加酶量對(duì)羊血清蛋白水解 度的影響。721型紫外分光光度計(jì)（惠普有限公司）、TGL-16M高 速臺(tái)式冷凍離心機(jī)（長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）、 JA2003N電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）、HWS28 型電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科技有限公司）、PB-10型精 密pH計(jì)（Sartorius公司）。

    pH值通過影響堿性蛋白酶分子活性部位上相關(guān)基團(tuán) 解離程度，進(jìn)而影響酶的作用，在最適pH時(shí)，酶分子上 活性基團(tuán)的解離狀態(tài)與底物結(jié)合最佳，pH 值高于或低于 最適pH時(shí)，酶活性基團(tuán)解離程度降低，影響酶和底物的結(jié) 合能力及酶的反應(yīng)速率。因此，確定堿性蛋白酶水解羊血 清蛋白的最適pH值為11。各響應(yīng)面隨著各個(gè)因素增大，羊血 清蛋白的 DH 均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)，羊血清蛋白的 DH 存在最大值；通過分析各因素之間相互作用對(duì)DH的影響， 確定堿性蛋白酶水解羊血清蛋白的最佳范圍。