1 材料與方法
谷胱甘肽:由湖南寶利士生物技術(shù)有限公司提供;牛血 清白蛋白(BSA)(含量≥98%,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),):aladdin; 溴連苯三酚紅(指示劑級(jí)):aladdin;檸檬酸、氫氧化 鈉、硫酸、二甲基亞砜(均為分析純):天津科密歐化學(xué)試 劑有限公司;超純水:由DZG-303A艾科超純水機(jī)制得;微孔 濾膜(硝化纖維型,Φ50cm,孔徑0.22μm):上海一恒科學(xué)儀器有限公司。
2.結(jié)果
對(duì)酶法合成的谷胱甘肽樣品中的蛋白殘留量的 檢測(cè)條件進(jìn)行了優(yōu)化,并對(duì)該檢測(cè)方法進(jìn)行了驗(yàn)證。最終 確定膜富集法測(cè)定谷胱甘肽樣品中的酶蛋白殘留量的檢測(cè) 條件為:檢測(cè)波長(zhǎng)416nm,顯色劑1.2ml,顯色時(shí)間20min; 蛋白濃度在0-150μg范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系(相關(guān)系數(shù) R2 =0.996);精密度試驗(yàn)結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小 于3%,平均加標(biāo)回收率為97.03%,RSD值1.45%,且該方法的 檢測(cè)限、定量限較低,分別為4.6ppm和13.9ppm。結(jié)果表明 該檢測(cè)方法可靠、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好,極微量的蛋白殘留均能 被檢測(cè)。
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